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生物发光法,活体成像技术,萤火虫荧光素酶,海肾荧光素酶
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    活体成像两种检测技术介绍

    活体成像

    特点

    优点

    缺点

    生物发光检测

    bioluminescence

    ★荧光素酶(Luciferase)对基因、细胞和活体动物进行标记;

    ★荧光素酶催化底物(例如荧光素钾盐)反应后,会产生化学发光。这种光是由化学反应而来,不需要激发光;

    ★标记方法是通过克隆技术,将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内,通过对克隆细胞进行筛选,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。

    ★特异性强,无自发荧光;

    ★高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞,检测的深度在3-100px;

    ★定量精确

     

    ★信号较弱,检测时间较长;★仪器精密度要求较高;

    ★细胞或基因需要转基因标记;

    ★不可用于人体,不适用于抗体、多肽等标记

    荧光检测

    fluorescence

    ★采用荧光报告基因 (GFP、RFP等) 或荧光染料进行标记;

    ★需要外接激发光源,利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光,就可以形成体内的生物光源。

    ★荧光染料、蛋白标记能力强;

    ★信号强,成像速度快,操作简便,实验成本较低;

    ★未来可用于人;

    ★适用范围广,可以是动物、细胞、微生物,也可以是抗体、药物、纳米材料等。

    ★存在自发荧光,影响灵敏度;

    ★光容易被动物组织吸收;

    ★检测深度受限;

    ★背景光干扰,定量准确度低


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